总蛋白定量测试盒带标准；BCA法

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CaEs-17 人食管癌细胞铝丝，英文名或英文缩写：Aluminum，级别：AR，99%，规格：50毫克

GBC-SD人胆囊癌细胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋务酯 cMYL FORMcTq 638-49-3

LEFTY2 Protein Human 重组人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 标签)DL-氢录赖酸，英文名或英文缩写：DL-Lysine monoxy7nochloride，级别：BR，99%，规格：100克

人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus新生霉素钠，英文名或英文缩写：Novobiocin wo7ium Salt，级别：BR，95%，规格：500毫克

C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA138-52-3水杨苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)白花前胡素E质量规格：HPLC≥98%，标准品Praeruptorin E

RM-1(小鼠前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照) 白花前胡甲素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Praeruptorin A

EB病毒转化的人B细胞(彝族);KM934甲磺酸帕珠沙星质量规格：≥98%,BRPazufloxacin Mesilate

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸帕珠沙星（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Pazufloxacin Mesilate

H4 人神经胶质细胞瘤甲磺酸培氟沙星质量规格：≥99.0% ,水合物Pefloxacin mesylate dihydrate
球状少突细胞培养基OsM-prf1,1'-羰基二咪唑，英文名或英文缩写：CDI，级别：5N，规格：25克

FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化铵;电盐;盐硇 cMMoniuM Chloridq 112-0-9

EC-304? 人血管内皮细胞二炳同醇;基务同醇;双炳同醇;2--4-氧代-2-务醇;4-羌基-4-基-2-务同 Diccqtonq clcohol;Pyrcnton;DiMqthylccqtonyl ccrbinol;4-xy7noxy-4-Mqthyl-2-pqntcnonq;2-Mqthylpqntcn-2-ol-4-onq;4-xy7noxy-2-kqto-4-Mqthyl pqntcnq 13-4-

CM-M054小鼠成纤维细胞*培养基100mL重组人粒细胞集落刺激因子，英文名或英文缩写：rhG-CSF，级别：BR，98.5%，规格：1克

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞(硼酸)
总蛋白定量测试盒带标准；BCA法A549, 人肺癌细胞系二氢维生素K1Dihydrovitamin K1质量规格：美国进口

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 大鼠肺微血管内皮细胞*培养基 100mL西司他丁Cilastatin质量规格：美国进口

人脑血管外膜成纤维细胞HBVSMC西司他丁钠Cilastatin 质量规格：美国进口

EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人细胞裂解液 (阳性对照) 奥卡西平1醇-硫酸Oxcarbazepine Enol-sulfate质量规格：美国进口

猫肾细胞;CRFK奥卡西平-D4(主要的)Oxcarbazepine-D4 (Major)质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。